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许多行业废水中会含有高浓度硝酸盐,硝酸盐进入水体后不仅会引起水体富营养化,对水生生物和人类的生产生活造成不利影响,且高浓度的硝酸盐容易被还原为亚硝酸盐,从而会对人体健康造成威胁[1]。目前,常用的污水脱氮工艺主要有物化法、生物法等,其中,物化方法主要有离子交换法、电渗析和反渗透等,但成本太高,很少使用;生物方法中的异养反硝化虽然已经得到广泛应用,也能取得不错的脱氮效果,但通常需要额外投加大量碳源,这些碳源会增加运营成本及工艺复杂性,此外,还会导致较高的污泥产量与温室气体排放。
硫自养反硝化技术作为一种低碳、低费、低污泥产量的反硝化技术逐渐受到研究人员的重视,近年来对其反应机理、参数调控及作用菌群的研究都取得了一定进步。文章总结了国内外学者对硫自养反硝化技术的研究进展,并对未来研究做出展望。
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硫自养反硝化技术,即以硫单质、硫化物或还原性含硫化合物作为电子供体及能源物质,将硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮气,不添加有机碳,同时降低污泥产率,其具体反应见式(1~4)[2]:
值得注意的是,以硫单质和还原性含硫化合物为电子供体的反应为产酸反应,而以硫化物为电子供体的反应为产碱反应。pH过低会导致亚硝酸盐及游离态H2S的生成,游离态的H2S会产生较大的毒性;而pH过高会超出硫自养反硝化菌群适宜pH范围,导致微生物活性下降。因此,学者们通过开发不同工艺来探讨不同底物硫自养反硝化的优势与弊端,不断推动着硫自养反硝化技术的进步。
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硫自养反硝化电子供体的选择会极大程度影响微生物反硝化动力学,因此,必须研究各种电子供体浓度、微生物亲和力和亲水性等参数以达到最佳反应条件,从而实现最优反硝化效率和速率[3]。
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单质硫是石油生产的副产品,其成本低廉、易于处理和运输、无毒无害且可以同时充当能源物质及填料[4],其进行自养反硝化的主要反应见式(1)。该反应伴随着大量硫酸盐及酸度的生成。文献[5-6]研究表明,每去除1 mg NO3−-N,就会有7.54 mg硫酸盐生成及消耗4.57 mg的碱度(以CaCO3计)。pH和碱度对于反硝化过程至关重要,而石灰石因其价廉易得通常被用作菌群自养生长的pH缓冲剂和无机碳源。因此,硫-石灰石自养反硝化系统(SLAD)应运而生,即在反应系统中加入一定比例的石灰石颗粒,反应过程中石灰石不断溶解充当缓冲剂[7]。然而,过量的CaCO3加入会导致工艺出水硬度上升从而间接造成磷沉淀,影响微生物的生长。CAPUA et al[8]研究发现,Ca(HCO3)2是一种可溶且用途更为广泛的石灰石替代品,可作为碱度和碳源的补充。
SAHINKAYA et al [9]在实验室使用单质硫、活性炭及石灰石作为固定床反应器填料,在0.72 g NO3−-N/(L·d)的负载条件下实现了近乎完全的自养反硝化。姚鹏程等[10]以小颗粒硫单质和NaHCO3作为底物,构建自养脱氮系统,在最佳运行条件下,可获得1.3 g/(L·d)的稳定脱氮能力。
此外,硫自养反硝化也可与其他工艺相耦合,以获得更高效的脱氮能力。方文烨等[11]开发了一种在单一反应器内单质硫自养短程反硝化耦合厌氧氨氧化(ANAMMOX)深度脱氮工艺,克服了传统ANAMMOX工艺出水NO3−-N高于理论值的缺陷[12],同时也获得了96.78%的总氮(TN)去除率。在“双碳”政策的启发下,人工湿地也成为时下研究热点,BEZBARUAH et al [13]将SLAD工艺与人工湿地相耦合处理城镇污水,获得了近乎100%的有机碳去除率和81%~90%的总氮去除率,其中SLAD贡献率约为49%。
使用硫单质作为电子供体最大的缺陷之一是其极低的水溶性,这会很大程度上限制相间传质速率,从而降低硫自养反硝化生物化学氧化速率。因此,有部分学者试图通过减小硫单质颗粒直径来增加微生物附着表面积及固液相界面积[14-16],然而,填充小颗粒硫单质可能会因为微生物生长等原因造成反应器堵塞,并且会造成气体滞留降低反应器性能[17]。
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在配水管道、下水道等厌氧环境中,硫酸盐还原菌(SRB)会把硫酸盐还原为H2S,而即使很低浓度的H2S也会产生毒性、恶臭以及腐蚀性。反应式(3)可知,以HS−、S2−等硫化物作为电子供体进行自养反硝化生成硫单质,实现了污染物资源化利用。不同于以硫单质为基质,以硫化物为电子供体的反应极大程度减少了硫酸盐的生成,从而避免了二次污染。但值得注意的是,当S/N比不足时,如反应式(2),同样会生成硫酸盐。事实上,S2−完全氧化为SO42−在热力学上远优于部分氧化为S0,并且在完全氧化为SO42−的反应过程中能观察到瞬时生成的S0[18-19]。反应式(2)和(3)可知,S2−完全氧化为SO42−相较于部分氧化为S0多消耗了4倍的电子供体,即NO3−,所以,在电子供体不充足的情况下会优先发生反应式(3),即生成S0。CARDOSO et al[19]发现仅在以化学计量比或更低的S/N比率提供NO3−时,硫化物才会完全氧化为SO42−。
LU et al[20]进行了一系列批次试验以探究不同硫化物浓度的影响,研究发现当硫化物浓度低于200 mg/L时,可以获得9.4 mg-N/(VSS·h)的脱氮效率,而此时限速步骤为亚硝酸盐的还原。有学者研究发现,在NO3−作为电子受体时,自养反硝化菌氧化S2−的速率比NO2−作为电子受体高2倍[21-22]。自养反硝化菌(S2−→S0)将NO3−还原为NO2−的能力远高于异养反硝化菌(acetate→CO2),相反,异养途径将NO2−还原为N2的能力高于自养途径[23-24]。因此,以硫化物为电子供体的自养反硝化可能会出现NO2−积累,从而抑制生化反应,而实际废水中通常含有部分有机污染物。基于此,混养反硝化工艺应运而生,由自养反硝化菌利用NO3−作为电子供体将其还原为NO2−,同时将S2−氧化为S0,异养反硝化菌利用废水中易生化降解物质做电子供体将NO2−还原为N2,从而实现脱氮。
CHEN et al[25]基于自养与异养菌的混合营养,在单个EGSB反应器中实现了将硫化物、硝酸盐和COD同步转化为S0、N2和CO2,通过生化作用产生的S0以胶体的形式存在于出水中,易于通过沉淀回收。YUAN et al[26]对此工艺进行进一步改造,使用硫酸盐还原-有机碳去除反应器、自养-异养脱硫反硝化反应器及好养硝化曝气池3个反应器串联,将某食品厂工业废水直接通入反应器,在实验室最优条件下实现了98%硫酸盐、98%COD和78%氨氮的同步去除,同时实现了高达90%的S0产率。而WANG et al[27]开发的硫酸盐还原、自养反硝化与硝化一体化工艺(SANI),可以实现95%的COD及74%的氨氮去除,不同的是,SANI工艺中SO42−被SRB还原为S2−之后流入下一阶段,其中一部分S2−被SOB完全氧化为SO42−而不是S0,而另一部分则以硫化物的形式存在于出水中。造成这一差异的主要原因是2个工艺进水不同的C/S比及S/N比,高C/S比会给反应提供额外的电子供体,低S/N比则会使反应需要额外的电子受体,这种反应参数会使S2−完全氧化为SO42−而不是S0。
然而,高浓度含硫化物污水会给微生物带来毒性抑制作用,若处理不当会导致系统处理能力下降。因此,此工艺对反应器启动即污泥驯化阶段提出了较高要求,可以采用诸如微氧曝气,采用纯菌接种进行生物强化等措施以提高微生物对硫化物毒性的耐受能力。此外,若要部分氧化S2−,使污染物资源化得到S0,需要保持稳定且适宜甚至苛刻的反应器运行条件。含大量硫化物废水一般呈强碱性,而以硫化物为基质的自养反硝化是产碱反应,因此需要定期加酸以保持适宜的弱碱pH范围。若流入反应器的S2−和NO3−分别是由硫酸盐还原及好氧硝化曝气池的出水提供,只要保持良好水力混合条件即可保持pH稳定[2]。
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一些还原性含硫化合物(如S2O32−)等也可以用作硫自养反硝化的电子供体,如反应式(3),不同于硫单质、硫化物不溶于水或对生物产生毒性,硫代硫酸盐易溶于水且无毒无害,研究表明,水中S2O32−浓度高达2.2 g/L时也不会对硫自养反硝化产生抑制作用并且可以充当电子供体去除高浓度NO3−[28]。CAPUA et al[29-30]发现高负荷S2O32−驱动的自养反硝化反应器在pH和温度分别恶劣至4.75和3 ℃时也能保持很高的除氮效率。然而,利用S2O32−做电子供体会产生大量SO42−,化学计量方程表明每1 g NO3−被还原为N2就会伴随着12.15 g SO42−的生成[31],SO42−的产生量分别是使用S0或S2−的1.4和2.0倍[3]。虽然,SO42−不会给人体健康带来直接影响,但是会显著改变人体感官特性,因此,《美国饮用水水质标准》等标准将饮用水中SO42−浓度限制为250 mg/L,从而间接限制了S2O32−的大规模应用[32]。
若仅采用S2O32−作电子供体产生大量SO42−势必会给出水后处理带来更多麻烦,因此,学者们尝试耦合其他工艺来减少SO42−的生成。SUN et al[31]对比了仅以S2O32−为电子供体的自养反硝化和额外投加乙酸钠的混养反硝化的反应效率,结果表明两种情况下都能取得近乎完全的反硝化效率,不同的是混养条件下的反硝化有更强抵御环境变化的能力以及更少的SO42−和N2O产生。周娅等[33]采用在反应器填料中添加硫铁矿的方法,同时解决了硫代硫酸盐的载体问题和硫铁矿启动慢的问题,并且减少了硫代硫酸钠的投加量。
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针对不同实际废水应选择不同电子供体进行处理,而反应器内部条件也会极大影响微生物群落的脱氮效率,如pH、溶解氧(DO)和水力停留时间(HRT)等,所以有必要探究各因素对于反应的影响情况,以使反应器得到最佳反硝化效率。
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以S0和S2O32−为基质的自养反硝化是产酸反应,若不加调控系统pH会逐渐降低,而以S2−为基质的反应是产碱反应。对生物化学反应而言,适宜的pH范围一般比较狭窄,有研究表明,自养反硝化菌最佳pH值介于6.8~8.2,同时,pH在6.5或9时反硝化效率快速降低[34-35]。
变形菌门在自养反硝化系统内占主导地位,且占总门超90%以上,pH变化对系统内的细菌丰度和细菌种类仅有轻微影响。然而,往往偏高的pH对硫自养反硝化脱氮效率更有帮助,CAPUA et al[29]通过向pH为4.75的体系中添加CO2等无机碳源,发现其仍能保持较为稳定的脱氮效果,其研究表明,低pH值对脱氮效率的影响主要是由于体系内无机碳的减少,而非直接对微生物活性产生影响。
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溶解氧是决定硫氧化细菌(SOB)、硝酸盐还原菌(NRB)和异养细菌共存和性能的关键因素,进而影响自养反硝化系统脱氮效率。高浓度的DO会抑制硫自养反硝化过程,其影响机理大体分为2种:一种观点认为DO会抑制反硝化酶的活性,另一种观点认为DO会作为电子受体与NO3−竞争[36]。然而,CHEN et al[37]发现在微氧条件下能显著提高硫化物去除率,微量DO的存在增强了自养反硝化菌的活性,但同时会抑制某些硫还原菌(如产甲烷菌)的活性。
在严格厌氧环境下,当硫化物、硝酸盐和碳源同时存在时,高浓度硫化物会显著抑制异养反硝化菌的活性,从而导致亚硝酸盐的积累[38-39]。在厌氧到微氧环境时(DO<0.3 mg/L),微生物群落功能组成和结构发生了显著变化,SOB和NRB活性会得到极大刺激,物种丰度大幅上升,异养细菌也可以将部分有机碳降解为小分子有机酸。然而,随着DO继续上升到0.5 mg/L以上时,SOB和NRB物种丰度下降,异养细菌(特别是碳降解物种)则富集[40]。
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HRT决定了水力负荷,在保证最优水处理效果条件下,越短的HRT代表越高的水力负荷,也就代表了越少的设施占地面积。在实际工程应用中,对于投资运行成本的考量是必不可少的环节,越低的成本则越容易实现推广应用。
许健等[41]考察HRT对以Na2S2O3作为电子供体的反硝化滤池处理效果的影响,结果表明,当HRT从12 h逐渐降至2 h的过程中始终能保持85%以上的NO3−-N去除率,但是HRT继续降低至0.5 h时,反硝化效率仅有65%。LIU et al[42]使用自养反硝化和厌氧氨氧化细菌共存的反应器实现硫化物和硝酸盐的去除,研究表明当HRT为8 h时,反应器取得最佳效果,硫化物和硝酸盐的去除率均达99%以上。事实上,不同反应器类型、反应基质和反应条件都会对HRT产生较大影响,但总体而言,以S2O32−为电子供体达到最佳处理效果的HRT明显优于S2−和S0。
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硫自养反硝化反应同步脱氮脱硫的核心是其功能菌群,即反硝化脱硫细菌(NR-SOB),因此通过生物强化等手段获得高效率高活性的功能菌群对于硫自养反硝化工艺发展具有重要意义。目前发现较多的NR-SOB主要包括脱氮硫杆菌(Thiobacillus denitrificans)、脱氮硫单胞菌(Sulfurimonas denitrificans)和泛养琉球菌(Thiosphaera pantotropha)[43]。此外,还有研究表明假单胞菌属(Pseudomonas)、苍白杆菌属(Ochrobactrum)、红球菌属(Rhodococcus)和固氮弧菌属(Azoarcus)等也具备一定脱硫脱氮的能力[44]。其中,Thiobacillus denitrificans属于典型自养硫氧化反硝化菌,而Azoarcus和Pseudomonas属于异养硫氧化反硝化菌。
王爱杰等[45]分离到一株可以实现高效同步脱氮脱硫的化能自养型兼性厌氧菌,经16S rDNA测序分析其为红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)。MAHMOOD et al[46]从厌氧硫氧化反应器中分离出苍白杆菌(Ochrobactrum sp.QZ2),该菌株是兼性化能微生物,能使用硫化物厌氧还原亚硝酸盐。然而到目前为止,对于NR-SOB的研究大多聚焦于脱氮硫杆菌,其最适宜生长温度和pH分别为28~30 ℃和6.5~7.0,可见该菌对温度、酸碱性及盐度等耐受性不强,实际应用潜力十分受限[44]。
在实际污水处理中,混养反硝化逐步受到研究人员关注。HUANG et al[47]通过高通量测序对混养反应器中功能性细菌进行分类,发现由陶厄氏菌(Thauera)和氮弧菌属(Azoarcus)等8个核心细菌群组成了反硝化脱硫系统的功能菌群。各核心微生物属之间的相关性很低,表明细菌功能群之间存在复杂的非特异性互利网络,可能通过利用混养条件下每种次生代谢物形成的共存状态,且这种复杂关系有助于反硝化系统微生物群落结构的稳定。ZHANG et al[48]通过自养、异养和混养条件下对比发现自养硫氧化反硝化细菌(a-soNRB)和异养反硝化菌(hNRB)协同作用在低硫条件下维持性能,异养硫氧化反硝化细菌(h-soNRB)与hNRB在高硫浓度下协同工作。即,a-soNRB是造成低硫转化的关键细菌,h-soNRB是造成高硫转化的主要原因。
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在当今“双碳”政策下,硫自养反硝化工艺由于其无需额外投加碳源、有效减少温室气体排放及低污泥产量等原因受到越来越广泛的关注和研究。文章对部分学者的研究成果进行总结,探究不同电子供体及各影响因素的影响。就脱氮效率而言,以S2O32−为电子供体效率最高,S2−次之,S0最弱。而就成本角度考虑,S0与S2−成本相近,S2O32−费用较高且为前者的6倍。在进行实际水处理时,电子供体的选择应结合多方面因素进行考虑,如:原水C/N/S之比,水体NO3−浓度等,此外,处理出水是否会造成二次污染也应纳入考虑范围内。
虽然目前硫自养反硝化工艺得到了一定程度发展与进步,但仍存在如下不足与缺陷:(1)现存大量研究对于不同基质的硫自养反硝化反应速率和机理等得出的结论并不完全一致,这可能与不完全一致的原水性质、反应器类型和微生物菌属种类等相关;(2)采用S0或S2O32−作为电子供体会产生大量SO42−,可能会对环境产生二次污染,目前对于SO42−的去除方法主要集中于金属沉淀法,但金属元素对于微生物及反硝化效率的影响尚不十分明确;(3)在实验室条件下实现最优反硝化效率需要十分苛刻的条件,若要将工艺扩大化进行工业化应用需要进一步探索研究;(4)对于不同环境下的混养微生物核心菌群的共存方式缺乏代表性与普遍性研究。相信在不久的将来,上述及更广泛的技术经济问题得到解决后,硫自养反硝化工艺必将得到更多实际应用。
硫自养反硝化技术研究进展与展望
Research status and prospect of sulfur-autotrophic denitrification technology
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摘要: 硫自养反硝化是一种具有低碳、低费、低污泥产量优势的脱氮技术。文章介绍了基于不同电子供体、pH、溶解氧(DO)和水力停留时间(HRT)等因素对硫自养反硝化反应效率的影响并对比了不同工艺的优缺点,阐述了硫自养反硝化工艺中微生物的群落特征,提出了现阶段存在的不足与缺陷,最后对其未来应用进行展望。Abstract: Sulfur autotrophic denitrification is a nitrogen removal technology with low carbon, low cost and low sludge yield. This paper introduces the influence of different electron donors, pH, dissolved oxygen (DO) and hydraulic residence time (HRT) on the efficiency of sulfur autotrophic denitrification, and compares the advantages and disadvantages of different processes in detail. It also describes the characteristics of microbial community in the sulfur autotrophic denitrification process, and proposes the deficiencies and defects at present stage. Finally, the future application of this technology is prospected.
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