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四环素类抗生素（tetracyclines，TCs）具有治疗和预防动物疾病、促进动物生长、提高畜牧业生产力等作用[1]，是我国畜禽养殖业中使用量最大的一类兽用抗生素，约占总使用量的37%[2 − 3]. 不同动物使用的抗生素类型和剂量不同. 猪和鸡的高养殖密度和较短的繁殖期，抗生素使用频繁；通常牛的养殖密度较低，抗生素相对使用率低[4]. 四环素类抗生素不能被动物机体完全吸收，以母体或代谢物的形式随畜禽粪便排出[5]. 畜禽粪便通过集中处理和种养结合等模式生产有机肥[6]的肥料化利用是其处理和资源化利用的主要方式[7]. 有机肥中仍存在较高浓度的土霉素、四环素和金霉素等TCs残留[8]，施用有机肥的农田土壤中TCs母体的残留水平也可高达mg·kg−1水平[9]. 残留的抗生素可能会对土壤微生物施加选择压力，导致细菌耐药性增加[10]；同时土壤中的抗生素也可被动、植物吸收，并可能通过食物链进入到人体，对健康构成潜在危害[11 − 12].
TCs容易发生水解或光解，可通过差向异构化，脱水和质子转移途径形成差向异构体、脱水产物、差向脱水产物等转化产物[13 − 14]. 一些四环素类转化产物不仅毒性更大，而且在环境中更稳定[12]. 有研究发现污泥中的TCs母体及转化产物可能会对水生生物造成明显的水生毒性风险[15]. 一些转化产物如脱水四环素对敏感和耐药的土壤细菌具有较大的毒性[13]. 为全面评估抗生素的环境影响，欧盟委员会“REACH”法规建议应同时考虑抗生素母体及转化产物的残留和风险[16]. 四环素类转化产物在畜禽粪便[17]和施肥土壤[18]中也有较高水平的检出. 猪粪源有机肥及其施肥土壤四环素类抗生素和转化产物的总浓度分别为851 μg·kg−1和776 μg·kg−1[19]. 然而，目前关于不同动物类型和资源化处理模式的有机肥及施肥土壤中四环素类抗生素的分布特征并不清楚，特别是针对四环素类抗生素转化产物的研究仍非常有限.
本研究以4种兽用TCs（四环素、土霉素、金霉素及强力霉素）及10种转化产物为研究对象，对全国8个省（市）不同类型畜禽粪便源（猪粪、鸡粪、牛粪及羊粪）有机肥样品进行采样调查，主要研究了1）有机肥中4种四环素类抗生素及10种转化产物的分布特征；2）不同动物类型和畜禽粪便处理模式对有机肥中四环素类抗生素及转化产物的影响；3）典型地区有机肥和施肥土壤中的四环素类抗生素及转化产物的残留情况. 本研究有助于了解畜禽粪便处理和利用过程中的四环素类转化产物的分布特征和归趋行为，为畜禽粪便的资源化利用和土壤安全施用提供数据基础.
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本研究选择了4种四环素类抗生素，包括四环素（tetracycline hydrochloride，98.0%）、土霉素（oxytetracycline hydrochloride，≥95%）、金霉素（chlortetracycline hydrochloride，96.9%）和强力霉素（doxycycline hyclate，99.3%）和10种主要转化产物4-差向四环素（4-epi-tetracycline hydrochloride，90.0%）、脱水四环素（anhydrotetracycline hydrochloride，93.0%）、4-差向脱水四环素（4-epianhydrotetracycline hydrochloride，87.1%）、4-差向金霉素（4-epi-chlortetracycline hydrochloride，84.9%）、异金霉素（isochlortetracycline，96.0%）、脱水金霉素（anhydrochlortetracycline hydrochloride，97.6%）、4-差向脱水金霉素（4-epi-anhydrochlortetracycline hydrochloride，95%）、4-差向土霉素（4-epi-oxytetracycline，≥95%）、α-apo-土霉素（alpha-apo-oxytetracycline，≥95%）、β-apo-土霉素（beta-apo-oxytetracycline，≥95%）进行了分析. 差向四环素、脱水四环素、脱水四环素和金霉素购自欧洲药品质量管理局，土霉素、差向土霉素、α-apo-土霉素、β-apo-土霉素购自美国Sigma公司，四环素、异金霉素、差向脱水金霉素购自加拿大Toronto Research Chemical公司，差向金霉素购自中国Bepure公司，强力霉素购自德国Dr. Ehrenstorfer GmbH公司. 内标四环素-d6（tetracycline-d6）、去甲基金霉素（demeclocycline hydrochloride，97.0%）、U-[13C2215N2]-土霉素和强力霉素-d3（doxycycline-d3）分别购自加拿大Toronto Research Chemical公司，德国Dr. Ehrenstorfer GmbH公司以及奥地利Romerlabs公司. 标准品充分溶于甲醇配制成浓度为100 mg·L−1的储备溶液，于-20 °C密封保存.
甲醇，乙腈和甲酸均为HPLC级，购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司. 柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠（Na2EDTA）和磷酸二钠（Na2HPO4）、盐酸（HCl）为分析纯级，购自国药集团化学试剂有限公司. 配制0.1 mol·L−1 Na2EDTA-McIlvaine缓冲液作为提取剂[17]. 固相萃取柱选用强阴离子交换柱（SAX，500 mg，6 mL，Agilent，USA）和Oasis HLB固相萃取柱（500 mg，6 mL，Waters，USA）.
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从2019年到2021年，在山东、上海、河南、河北、内蒙古、新疆、青海、吉林等8个省（自治区、市）采集畜禽粪便源有机肥样品55个（7月、12月采集青海有机肥样品；3月、9月采集上海有机肥；其余有机肥于12月采集）. 根据畜禽粪便资源化处理模式的不同，有机肥样品主要分为集中处理模式和种养结合模式生产的有机肥[6]. 其中23个有机肥样品为种养结合模式生产的有机肥，大部分采用自然堆置处理工艺（青海10个，上海10个，新疆3个）；32个有机肥样品为集中处理模式生产的有机肥，采用高温堆肥处理工艺（其余5个省份采集）. 在每个堆肥阶段结束时采集有机肥样品. 在上海采集9个施用畜禽粪便源有机肥的种有农作物的土壤样品（施肥约2月后采集）和5个未施肥的对照土壤样品. 有机肥和土壤样品采回后经冷冻干燥处理，研磨，过0.5 mm筛，于-20 °C密封保存用于测定.
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有机肥样品[20 − 21]：称取1 g干燥研磨的有机肥样品，加入100 μL内标混合液（200 μg·L−1），静置过夜. 加入5 mL Na2EDTA-McIlvaine缓冲液（pH=4.0），涡旋混匀后再加入5 mL有机提取液（甲醇/乙腈，3:2，V/V），涡旋1 min后超声提取15 min，3750 r·min−1下离心10 min，收集上清液. 再重复提取2次，合并上清液过0.45 μm微孔有机滤膜. 加超纯水稀释至300 mL后用稀盐酸调节pH至3.0. 依次用5 mL甲醇，5 mL超纯水和5 mL Na2EDTA-McIlvaine缓冲液活化固相萃取柱. 提取液以3—5 mL·min−1的流速通过SAX-HLB串联固相萃取柱进行富集净化. HLB柱用5 mL超纯水和5 mL的5%甲醇水溶液淋洗并氮气吹干，然后用10 mL含0.01 mol·L−1草酸的甲醇溶液洗脱目标物. 洗脱液在35 °C下氮吹至近干，用1 mL 1:9甲醇水溶液复溶，过0.22 μm有机滤膜，待测.
土壤样品[18]：称取1 g 干燥研磨后的土壤样品，加入100 μL 内标混合液. 提取过程与有机肥样品相同. 土壤提取液用HLB固相萃取柱净化与富集，其余处理过程与有机肥样品相同.
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采用Waters Acquity超高效液相色谱和Acquity UPLC BEH RP18色谱柱（1.7 μm；2.1 mm × 100 mm，Waters）实现14种目标物的分离. 柱温为35 °C，进样量为5 μL[13]. 流动相使用0.1%的甲酸水（A）和甲醇（B），流速为0.3 mL·min−1，采用梯度洗脱程序如下：0—1 min，15% B；1—4.5 min，15%—25% B；4.5—7.5 min，25%—90% B；7.5—8.5 min，90%—100% B；8.5—10.5 min，100%—15% B，并保持1 min，总运行时间为11.5 min.
质谱分析使用Waters Micromass XEVO TQ质谱，正离子模式，操作参数为：离子源温度为150 °C；脱溶剂温度为350 °C；脱溶剂气流速为600 L·h−1；锥孔气流速为50 L·h−1；毛细管电压为3.20 kV. 采用多反应监测（MRM）模式检测.
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本研究采用多内标法定量分析. TC-d6[4]、DC-d3[22]、DMC[21]和U-[13C2215N2]-OTC[22]分别作为TC、DC、CTC和OTC及其相应转化产物的内标物. 各目标物标准曲线的R2均大于0.99. 有机肥中所选目标物的方法定量限为0.6—5.0 μg·kg−1. 20、100 μg·L−1 两个加标浓度下回收率及相应的相对标准差（RSD）见表1. 有机肥四种母体的加标回收率为122%—136%，RSD小于3.0%. 除差向脱水金霉素（12%—16%），其余转化产物加标回收率为38%—130%，RSD小于11.0%. 有机肥中脱水产物的低回收率情况也有不少报道[17-18，23]. 脱水产物及其差向异构体的回收率较低可能是由于脱水产物的构象不同于母体，与有机肥基质中的腐殖质和矿物的吸附能力也不同[18]. 本研究通过采用多内标法和适当提高氮吹温度缩短氮吹时间等方法，在一定程度上提高了有机肥中脱水产物的回收率. 土壤样品中母体、差向异构体和异金霉素的方法定量限为0.7—5.0 μg·kg−1，加标回收率为83%—135%.
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利用Microsoft Excel 2019、SPSS 26及Origin 2022进行数据分析和作图.
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在8个省（市）的畜禽粪便源有机肥样品中4种四环素类抗生素母体均有检出. TC、DC、CTC和OTC的浓度分别为1.63—4348 μg·kg−1、ND—11450 μg·kg−1、ND—30300 μg·kg−1、7.11—55008 μg·kg−1，检出率为76%—100%（表2），表明这些抗生素在畜禽养殖业广泛使用. 本研究中的大部分四环素类抗生素母体浓度水平与已有报道相当[8，24-25]. 据报道，动物体内的四环素类抗生素30%—90%以母体或代谢物的形式随畜禽粪尿排放[5]. 目前常用的兽用TCs包括在C5、C9上有不同取代基的金霉素、土霉素、四环素等第一代四环素类，及对其母核进行修饰的第二代半合成的强力霉素[13]. 不同取代基结构、不同代际TCs影响其药物代谢和动力学，第一代四环素类吸收率为25%—90%，而强力霉素脂溶性相对较高，排泄缓慢，有较长的持续期[26]. 因此，畜禽养殖使用TCs后的粪便中不同TCs可能从形态到浓度赋存表现出差异，进而影响其在畜禽粪便源有机肥中的赋存情况. 此外，有机肥中四环素类抗生素的残留量较大差异，可能与动物类型[4]、处理方式等有关[27]. 10种四环素类转化产物在有机肥中也存在较高浓度的残留. 差向异构体的平均浓度为129—1277 μg·kg−1. 嘉兴等地猪粪肥中ETC的浓度也被报道与其母体TC的浓度相当[19]. CTC易不可逆生成ICTC，浓度范围在ND—8205 μg·kg−1之间. TC、CTC、OTC及其差向异构体中C-5a位的氢和C-6位的羟基易发生脱水反应形成脱水产物和差向脱水产物. 脱水产物和差向脱水产物的检出率和浓度远低于母体，其中ATC和EATC的平均浓度分别为59.9、47.5 μg·kg−1，与Qiao等[19]和Zhou等[20]对猪粪肥和鸡粪肥中四环素类抗生素及转化产物污染的研究结果相当. 脱水产物在强酸性条件下形成[17]，而且有机肥中重金属对脱水产物的螯合能力较强，可能造成有机肥中脱水产物的浓度较低.
探究了有机肥中四环素类抗生素及转化产物的组成情况（图1）. 四环素、金霉素、土霉素转化产物的浓度占相应类型抗生素母体及转化产物总浓度的20%—55%. 一方面，兽用四环素类抗生素不能被动物机体完全吸收，以母体或代谢物的形式随畜禽粪便排出[5]. 另一方面，畜禽粪便中的四环素类抗生素及转化产物经堆肥过程均可以被有效降解，同时堆肥过程中母体抗生素也会生成转化产物. 其中差向异构体ETC、ECTC和EOTC是有机肥中主要的转化产物，这可能是由于四环素类抗生素容易在C-4位发生差向异构化[13]. 本研究结果发现畜禽粪便源有机肥样品中存在较高浓度的四环素类转化产物，为全面评估抗生素的环境影响，应同时考虑抗生素母体及转化产物的残留和风险.
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不同畜禽粪便源的有机肥中的抗生素残留水平具有明显差异（图2）. 畜禽粪便源有机肥中总四环素类抗生素（4种母体和10种转化产物的加和）的平均浓度依次为：（15420 μg·kg−1）>鸡粪肥（3963 μg·kg−1）>羊粪肥（1481 μg·kg−1）>牛粪肥（569 μg·kg−1）. 猪粪肥样品中TC、DC、CTC和OTC的抗生素浓度和检出率均高于鸡粪肥、牛粪肥和羊粪肥，浓度范围分别为1.63—4348 μg·kg−1、ND—11451 μg·kg−1、ND—30300 μg·kg−1、ND—30424 μg·kg−1，与北京、辽宁地区[9]和浙北地区[28]猪粪肥的结果相当. 在21个鸡粪肥样本中，OTC、DC是浓度较高的四环素类母体，平均浓度分别为2728、319 μg·kg−1，与马来西亚[29]和云南[30]鸡粪肥样品浓度水平相当. 羊粪肥样品中TC、CTC的残留水平相对较高，平均浓度分别为333、196 μg·kg−1. 牛粪肥样品中TC、CTC和OTC的检出率和浓度低于其他动物类型的有机肥.
四环素类母体的浓度和检出率较高的有机肥样品，其转化产物的浓度也较高. 不同动物种类的有机肥样品中转化产物也存在显著差异. 猪粪肥样品中四环素和金霉素相应转化产物总浓度显著高于鸡粪肥、牛粪肥和羊粪肥（P<0.05）. 在检出转化产物的有机肥样品中，不同畜禽粪便源有机肥中四环素产物的平均浓度大小依次是猪粪肥（503 μg·kg−1）>羊粪肥（287 μg·kg−1）>鸡粪肥（32.7 μg·kg−1）>牛粪肥（29.1 μg·kg−1）. 猪粪肥平均浓度顺序为：ETC（296 μg·kg−1）＞ATC（115 μg·kg−1）＞EATC（92.3 μg·kg−1）. 金霉素产物在猪粪肥和羊粪肥中的浓度较高，其中占比最高的金霉素产物ECTC的平均浓度分别为3598、113 μg·kg−1. 土霉素产物在4种有机肥中均有较高浓度的检出，其中猪粪肥中EOTC的平均浓度可达到642 μg·kg−1.
与牛粪肥相比，猪粪肥和鸡粪肥中四环素类抗生素浓度较高. 由于猪和鸡的养殖密度高和繁殖期短，抗生素频繁使用以促进动物生长和预防疾病，但养牛场使用率相对较低[4]. 此外，目前研究主要集中在猪、牛和鸡粪[31]，对羊粪的关注较少，本研究的羊粪肥主要来自规模化养殖场，其四环素类抗生素及转化产物的污染不容忽视.
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根据畜禽粪便资源化利用方式主要分为集中处理和种养结合两种模式，对畜禽粪便进行处理和综合利用. 不同处理模式可能会影响畜禽粪便源有机肥中四环素类抗生素的浓度和检出率（图3）. 种养结合模式生产的有机肥四环素类母体的检出率较高，浓度显著高于集中处理模式生产的有机肥（P<0.05），TC、DC、CTC和DC在种养结合模式生产的有机肥中的最大浓度分别为4348、11451、30300、55008 μg·kg−1，显著高于其在集中处理模式生产的有机肥的最大浓度（1632、5246、647、337 μg·kg−1）. 种养结合模式生产的有机肥中各种转化产物的浓度也显著高于集中处理模式生产的有机肥（P<0.05）. 两种模式生产的有机肥中差向异构体均是主要转化产物，种养结合模式生产的有机肥中差向异构体的平均浓度范围为251（ETC）—2995（ECTC） μg·kg−1，高于集中处理模式生产的有机肥.
畜禽粪便经过收集进行好氧堆肥生产有机肥，在堆肥过程中四环素类抗生素的降解行为是生物降解和热降解等的协同作用，可以通过差向异构化、脱水或其他途径产生转化产物[32]. 同时，畜禽粪便中残留母体四环素类抗生素和转化产物，在堆肥过程中，母体和转化产物的浓度都会由于发生生物降解和水解等而降低. 相较于种养结合模式，集中处理模式优势更为明显. 集中处理模式是对周边养殖场的畜禽粪便实行专业化收集和运输，并按资源化、无害化、标准化要求进行集中处理和综合利用[6]. 本研究中集中处理模式生产商品有机肥，处理要求高，大多采用高温堆肥工艺，有机肥中残留抗生素浓度低，畜禽粪便资源化利用的效率和水平提高[33]. 种养结合模式生产的有机肥是闭环应用，将畜禽养殖产生的粪便生产加工有机肥应用于种植业，同时种植业生产的作物为畜禽养殖提供食源，其四环素类浓度残留相对较高，可能是因为有机肥生产工艺可能未达到有机肥料的工业生产标准[34]. 本研究中种养结合模式大部分采用自然堆置处理工艺，堆肥过程高温阶段的温度相对较低且维持时间较短，抗生素去除效果较差[35]. 因此应选择合适的利用模式，优化处理工艺，合理利用畜禽粪便资源，可以降低有机肥施用的潜在风险.
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畜禽粪便源有机肥的施用是土壤抗生素污染的主要来源之一[36 − 37]. 对上海5个农场生产的猪粪有机肥和施肥土壤及未施肥土壤对照样品中四环素类抗生素及转化产物的残留浓度进行了检测，结果发现四环素类抗生素在施肥土壤中普遍检出. TC和OTC在施肥土壤中的检出率达100%，浓度范围分别为6.18—338 μg·kg−1和4.63—497 μg·kg−1. DC和CTC的检出率较低，平均浓度分别为53.1 μg·kg−1和195 μg·kg−1. 施肥土壤中差向异构体EOTC、ETC和ECTC检出率较高，分别为100%、89%和78%，平均浓度分别为77.2、13.1、65.9 μg·kg−1. ICTC的检出率较低（22%），最高浓度为16.1 μg·kg−1. 土壤抗生素组成与有机肥表现出一定的相似性. 差向异构体在农田土壤中仍是持续存在的主要四环素类转化产物. 本研究对比检测了未施肥对照土壤，发现四环素类及转化产物的浓度显著低于施肥土壤（图4）. 此外，检测了新疆地区鸡粪肥和施肥土壤，部分施肥土壤检测到强力霉素和金霉素，浓度分别为7.42、29.8 μg·kg−1，而未施肥土壤中未检出强力霉素和金霉素，也说明了施肥土壤中抗生素残留来源于畜禽粪便源有机肥的施用[38].
有机肥中残留的四环素类抗生素扩散进入土壤环境中并在土壤中积累，可能会造成较高的陆地生态毒性风险[39]和耐药性扩散风险，将对动物源的食品安全和公共卫生构成威胁[10，40]. 同时由于结构相似性，施肥进入土壤的四环素类转化产物可能也具有较强的持久性和一定环境风险[14]. 已有研究发现污泥中残留的四环素类及转化产物对3种水生生物（绿藻、水蚤和鱼类）具有生态毒性风险[14]，残留的转化产物也被报道可能增加抗生素耐药性风险[41]. 因此需要进一步研究四环素类转化产物可能带来的潜在风险.
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（1）本研究对55个畜禽粪便源有机肥样品中4种四环素类抗生素及10种转化产物进行同步检测分析. 发现畜禽粪便源有机肥中4种四环素类抗生素普遍检出，残留浓度可高达mg·kg−1，四环素、金霉素转化产物的总浓度几乎与母体浓度相当，差向异构体是有机肥中主要转化产物. 施用含四环素类抗生素有机肥的农田土壤能检出四环素类抗生素和部分转化产物，差向异构体仍是主要转化产物.
（2）有机肥中抗生素的残留情况受到畜禽种类和资源化利用模式的影响. 四环素类抗生素及转化产物的浓度和检出率在猪粪肥样品中高于鸡粪肥、牛粪肥和羊粪肥；在种养结合模式生产的有机肥中也显著高于集中处理模式生产的有机肥.
（3）未来应进一步开展四环素类转化产物在畜禽粪便处理和资源化利用过程中的残留水平、环境行为和潜在风险的研究.
畜禽粪便源有机肥中四环素类抗生素及转化产物的分布特征
Occurrence of tetracyclines and their transformation products in manure-based organic fertilizers
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摘要: 畜禽粪便源有机肥是农田土壤中抗生素母体及转化产物污染的重要来源之一. 为研究畜禽粪便源有机肥中四环素类抗生素及转化产物的残留情况，在全国8个省（市）采集55 个有机肥样品，采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS），分析畜禽粪便源有机肥中四环素、强力霉素、金霉素和土霉素4 种四环素类抗生素及10种转化产物的分布特征. 结果表明，四环素、强力霉素、金霉素和土霉素在55个有机肥样品中均有检出，浓度分别为1.63—4348 μg·kg−1、ND—11451 μg·kg−1、ND—30300 μg·kg−1、7.11—55008 μg·kg−1. 10种转化产物中，差向异构体是主要的转化产物. 不同畜禽粪便来源的有机肥中四环素类抗生素及转化产物的浓度存在显著差异，猪粪肥样品中四环素类抗生素及转化产物的浓度高于鸡粪肥、牛粪肥和羊粪肥. 畜禽粪便资源化利用模式可能也会影响有机肥中四环素类抗生素的浓度. 种养结合模式生产的有机肥中四环素类抗生素及转化产物的浓度显著高于集中处理模式生产的有机肥. 进一步研究了典型地区畜禽粪便源有机肥和施肥土壤中的四环素类抗生素及转化产物残留的污染特征，发现四环素类抗生素及转化产物通过施用有机肥进入土壤环境中，差向异构体在施肥土壤中仍是主要的转化产物. 畜禽粪便源有机肥和施肥土壤中四环素类抗生素及转化产物的残留不容忽视.Abstract: Manure-based organic fertilizers are important sources of pollution of antibiotic and transformation products in farmland soil. To study the residues of tetracyclines and transformation products in manure-based organic fertilizers, 55 organic fertilizer samples were collected from eight provinces in China. Ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) was used to analyze the distribution characteristics of tetracycline, doxycycline, chlortetracycline, oxytetracycline and their transformation products in organic fertilizers. The results showed that tetracycline, doxycycline, chlortetracycline and oxytetracycline were detected in 55 organic fertilizer samples, and the concentrations were 1.63—4348 μg·kg−1, ND—11451 μg·kg−1, ND—30300 μg·kg−1, 7.11—55008 μg·kg−1, respectively. Among the 10 transformation products, the 4-epimers were the main transformation products. There were significant differences in the contents of tetracyclines and their transformation products in organic fertilizers produced from manure of different animal species. The concentrations and detection rates of tetracyclines and their transformation products in swine manure fertilizers were higher than those in chicken manure fertilizers, cattle manure fertilizers and sheep manure fertilizers. The treatment model of resource utilization of livestock manure might also affect the contents of tetracyclines in organic fertilizers. The concentrations of tetracyclines and their transformation products in organic fertilizers produced by the model of combination of farming and animal husbandry were significantly higher than those produced by the mode of centralized treatment. The pollution characteristics of tetracyclines and their transformation products in manure-based organic fertilizers and fertilized soil in typical areas were further studied. The results showed that the 4-epimers were still the main transformation products in the fertilized soil. Therefore, the residues of tetracyclines and their transformation products in manure-based organic fertilizers and fertilized soil cannot be ignored.
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图 1 畜禽粪便源有机肥样品（n=55）中四环素（a）、金霉素（b）和土霉素（c）及转化产物的组成
Figure 1. The composition of tetracycline （a）, chlorotetracycline （b） and oxytetracycline （c） and their transformation products in manure-based organic fertilizer samples （n=55）
图 2 不同畜禽粪便源的有机肥中四环素类抗生素（a）及转化产物（b）残留浓度
Figure 2. Residual concentrations of tetracyclines （a） and transformation products （b） in manure-based organic fertilizers of different animal types
图 3 种养结合模式和集中处理模式的有机肥样品中四环素类抗生素及转化产物的浓度
Figure 3. The concentrations of tetracyclines and their transformation products in organic fertilizer samples from the models of the combination of farming and animal husbandry and centralized processing
图 4 上海5个农场有机肥和施肥土壤中四环素类抗生素及转化产物的浓度
Figure 4. The concentrations of tetracyclines and transformation products in organic fertilizer and fertilized soil from five farms in Shanghai
表 1 畜禽粪便源有机肥和土壤样品中四环素类及转化产物的加标回收率
Table 1. The recoveries of tetracyclines and their transformation products in manure-based organic fertilizer and soil samples
目标分析物
Compounds畜禽粪便源有机肥
Manure-based organic fertilizer土壤
Soil20 μg·L−1 100 μg·L−1 20 μg·L−1 100 μg·L−1 四环素（TC） 133% （2.1%） 127% （1.9%） 135% （3.1%） 119% （0.8%） 差向四环素（ETC） 113% （3.1%） 101% （2.3%） 103% （1.2%） 96% （1.2%） 脱水四环素（ATC） 88% （13%） 71% （3.4%） — — 差向脱水四环素（EATC） 64% （3.3%） 46% （8.5%） — — 强力霉素（DC） 124% （3.0%） 123% （0.4%） 85% （1.6%） 83% （1.7%） 金霉素（CTC） 136% （2.5%） 123% （1.8%） 118% （1.3%） 103% （0.7%） 差向金霉素（ECTC） 130% （5.2%） 113% （3.5%） 114% （2.0%） 107% （0.8%） 异金霉素（ICTC） 113% （0.7%） 116% （2.7%） 90% （1.7%） 83% （1.5%） 脱水金霉素（ACTC） 43% （11.0%） 38% （1.5%） — — 差向脱水金霉素（EACTC） 16% （10.8%） 12% （11.0%） — — 土霉素（OTC） 122% （1.3%） 129% （0.6%） 109% （2.3%） 88% （1.0%） 差向土霉素（EOTC） 129% （1.8%） 122% （4.0%） 113% （4.2%） 86% （7.2%） α-apo-土霉素（α-apo-OTC） 96% （3.5%） 83% （4.4%） — — β-apo-土霉素（β-apo-OTC） 54% （8.6%） 49% （1.6%） — — 注：测定了20、100 μg·L−1 两个加标浓度下四环素类抗生素及转化产物的回收率. 表中数据表示回收率（RSD）. “—”表示未分析.
Note: The recoveries of tetracyclines and transformation products at two spiked concentrations of 20 and 100 μg·L−1 were determined. The values in the table represent recovery （RSD）; “—” indicates that the data is not analyzed.
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表 2 畜禽粪便源有机肥样品中四环素类抗生素及转化产物的浓度
Table 2. The concentrations of tetracyclines and their transformation products in manure-based organic fertilizer samples
目标物
Compounds检出率
Frequency平均浓度/（μg·kg−1）
Mean最小值 /（μg·kg−1）
Minimum中位值/（μg·kg−1）
Median最大值/（μg·kg−1）
MaximumTC 100% 267 1.63 27.8 4348 ETC 93% 129 ND 13.6 2270 ATC 49% 59.9 ND 12.6 543 EATC 49% 47.5 ND ND 644 DC 76% 903 ND 70.7 11450 CTC 76% 1314 ND 27.7 30300 ECTC 87% 1277 ND 19.5 31310 ICTC 46% 302 ND 6.99 8205 ACTC 9% 16.8 ND ND 189 EACTC 42% 5.78 ND ND 85.0 OTC 100% 2265 7.11 53.5 55008 EOTC 95% 518 ND 64.6 12772 α-apo-OTC 27% 33.6 ND ND 672 β-apo-OTC 22% 4.63 ND ND 70.0 四环素类抗生素总和 100% 7143 54.6 584 104905 注：检出率=检出四环素类抗生素的样品数/采样数；四环素类抗生素总和为4种四环素类抗生素及10种转化产物浓度之和；ND., 未检出，低于各自的方法检出限.
Note: Detection rate=Number of samples with tetracyclines /Sample numbers; Sum of tetracyclines represent the total concentrations of 4 tetracyclines and 10 transformation products; ND., Not detected, less than the respective method detection limits.
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