养猪废水中抗生素和铜对潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用的影响

张家亮, 杨升, 唐珠, 杨新萍. 养猪废水中抗生素和铜对潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用的影响[J]. 环境工程学报, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031
引用本文: 张家亮, 杨升, 唐珠, 杨新萍. 养猪废水中抗生素和铜对潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用的影响[J]. 环境工程学报, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031
ZHANG Jialiang, YANG Sheng, TANG Zhu, YANG Xinping. Effects of antibiotics and copper in swine wastewater on soil respiration and reed photosynthesis in subsurface flow constructed wetlands[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031
Citation: ZHANG Jialiang, YANG Sheng, TANG Zhu, YANG Xinping. Effects of antibiotics and copper in swine wastewater on soil respiration and reed photosynthesis in subsurface flow constructed wetlands[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031

养猪废水中抗生素和铜对潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用的影响

    作者简介: 张家亮 (1999—) ,男,硕士研究生。研究方向为水污染控制工程,2558116015@qq.com
    通讯作者: 杨新萍(1972—),女,博士,教授。研究方向为水污染控制工程,xpyang@njau.edu.cn
  • 基金项目:
    国家自然科学基金面上资助项目(31870489)
  • 中图分类号: X 703

Effects of antibiotics and copper in swine wastewater on soil respiration and reed photosynthesis in subsurface flow constructed wetlands

    Corresponding author: YANG Xinping, xpyang@njau.edu.cn
  • 摘要: 为了探究养猪废水中抗生素和重金属对潜流人工湿地土壤微生物和植物生长的影响,构建了水平潜流人工湿地和垂直潜流人工湿地,用“根袋”法区分芦苇根际和非根际土壤。每种潜流人工湿地根据进水差异设置4个处理组:进水为模拟养猪废水(CK组)、模拟养猪废水中添加抗生素(抗生素组)、模拟养猪废水中添加铜(Cu组)、模拟养猪废水中同时添加抗生素和Cu(抗生素+Cu组),对2种潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用指标进行为期1年的监测。结果表明:养猪废水中添加18.3~39.1 µg·L−1抗生素或0.8~1.2 mg·L−1铜均可抑制潜流人工湿地的芦苇根际、非根际土壤呼吸和芦苇的光合作用。与CK组相比,在抗生素和Cu复合胁迫下,水平和垂直潜流人工湿地芦苇根际土壤呼吸分别下降了20.4%~66.3%和20.8%~77.5%,非根际土壤呼吸分别下降了30.4%~71.0%、23.2%~60.7%,垂直潜流人工湿地的芦苇根际、非根际土壤呼吸在春、夏、秋季均显著高于水平潜流人工湿地。在抗生素和Cu复合胁迫下,水平潜流人工湿地和垂直潜流人工湿地芦苇的株高在运行后期与CK组相比均显著降低。与CK组相比,水平潜流人工湿地和垂直潜流人工湿地芦苇净光合速率分别下降了11.0%~73.8%和15.2%~45.3%,气孔导度和蒸腾速率也受到了抑制,胞间CO2浓度则呈增加趋势。垂直潜流人工湿地比水平潜流人工湿地对养猪废水具有更好的深度处理能力。
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  • 图 1  潜流人工湿地装置示意图

    Figure 1.  Schematic diagram of subsurface flow constructed wetland device

    图 2  2022年南京气温变化

    Figure 2.  Variation of temperature in Nanjing in 2022

    图 3  不同季节潜流人工湿地芦苇根际和非根际土壤CO2排放通量的变化

    Figure 3.  Changes in CO2 emission fluxes in reed rhizosphere and non-rhizosphere soils of subsurface flow constructed wetlands in different seasons

    图 4  不同季节潜流人工湿地中芦苇的光合作用指标变化

    Figure 4.  Changes in photosynthetic index of reed in subsurface flow constructed wetlands in different seasons

    表 1  夏秋两季潜流人工湿地芦苇株高变化

    Table 1.  Changes in the height of reed in subsurface flow constructed wetlands during summer and autumn

    装置类型 取样月份 CK组 Cu组 抗生素组 抗生素+Cu组
    HSFCWs 2022-06 63.27±3.71 a 67.20±5.91 a 66.93±3.15 a 61.03±2.32 a
    2022-07 94.32±13.64 a 84.50±7.05 a 106.87±8.32 a 93.65±10.45 a
    2022-08 124.67±12.29 a 110.47±3.73 a 116.73±6.56 a 113.20±5.86 a
    2022-09 139.30±8.36 a 120.67±7.94 a 120.03±7.48 a 120.40±2.80 a
    2022-10 159.13±1.97 a 141.87±6.99 b 137.00±5.90 b 130.20±3.22 b
    2022-11 145.43±2.55 a 131.80±1.76 b 123.90±5.91 b 123.73±3.43 b
    VSFCWs 2022-06 57.43±2.89 a 53.43±1.40 a 58.77±4.38 a 54.93±4.09 a
    2022-07 115.60±8.39 a 92.20±4.53 a 105.43±11.90 a 118.73±3.90 a
    2022-08 162.83±6.55 a 154.93±6.55 a 155.67±8.32 a 161.03±8.17 a
    2022-09 190.63±4.48 a 176.83±4.66 a 178.37±4.30 a 185.73±6.77 a
    2022-10 253.07±9.89 a 230.97±6.71 b 220.93±11.58 b 223.37±3.23 b
    2022-11 274.77±3.25 a 241.47±15.66 b 225.25±14.92 b 231.53±1.90 b
      注:表中相同小写字母代表处理组间无显著差异,不同小写字母代表处理组间具有显著差异。
    装置类型 取样月份 CK组 Cu组 抗生素组 抗生素+Cu组
    HSFCWs 2022-06 63.27±3.71 a 67.20±5.91 a 66.93±3.15 a 61.03±2.32 a
    2022-07 94.32±13.64 a 84.50±7.05 a 106.87±8.32 a 93.65±10.45 a
    2022-08 124.67±12.29 a 110.47±3.73 a 116.73±6.56 a 113.20±5.86 a
    2022-09 139.30±8.36 a 120.67±7.94 a 120.03±7.48 a 120.40±2.80 a
    2022-10 159.13±1.97 a 141.87±6.99 b 137.00±5.90 b 130.20±3.22 b
    2022-11 145.43±2.55 a 131.80±1.76 b 123.90±5.91 b 123.73±3.43 b
    VSFCWs 2022-06 57.43±2.89 a 53.43±1.40 a 58.77±4.38 a 54.93±4.09 a
    2022-07 115.60±8.39 a 92.20±4.53 a 105.43±11.90 a 118.73±3.90 a
    2022-08 162.83±6.55 a 154.93±6.55 a 155.67±8.32 a 161.03±8.17 a
    2022-09 190.63±4.48 a 176.83±4.66 a 178.37±4.30 a 185.73±6.77 a
    2022-10 253.07±9.89 a 230.97±6.71 b 220.93±11.58 b 223.37±3.23 b
    2022-11 274.77±3.25 a 241.47±15.66 b 225.25±14.92 b 231.53±1.90 b
      注:表中相同小写字母代表处理组间无显著差异,不同小写字母代表处理组间具有显著差异。
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出版历程
  • 收稿日期:  2024-02-08
  • 录用日期:  2024-05-29
  • 刊出日期:  2024-07-26
张家亮, 杨升, 唐珠, 杨新萍. 养猪废水中抗生素和铜对潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用的影响[J]. 环境工程学报, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031
引用本文: 张家亮, 杨升, 唐珠, 杨新萍. 养猪废水中抗生素和铜对潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用的影响[J]. 环境工程学报, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031
ZHANG Jialiang, YANG Sheng, TANG Zhu, YANG Xinping. Effects of antibiotics and copper in swine wastewater on soil respiration and reed photosynthesis in subsurface flow constructed wetlands[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031
Citation: ZHANG Jialiang, YANG Sheng, TANG Zhu, YANG Xinping. Effects of antibiotics and copper in swine wastewater on soil respiration and reed photosynthesis in subsurface flow constructed wetlands[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2024, 18(7): 1803-1811. doi: 10.12030/j.cjee.202402031

养猪废水中抗生素和铜对潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用的影响

    通讯作者: 杨新萍(1972—),女,博士,教授。研究方向为水污染控制工程,xpyang@njau.edu.cn
    作者简介: 张家亮 (1999—) ,男,硕士研究生。研究方向为水污染控制工程,2558116015@qq.com
  • 南京农业大学资源与环境科学学院,南京 210095
基金项目:
国家自然科学基金面上资助项目(31870489)

摘要: 为了探究养猪废水中抗生素和重金属对潜流人工湿地土壤微生物和植物生长的影响,构建了水平潜流人工湿地和垂直潜流人工湿地,用“根袋”法区分芦苇根际和非根际土壤。每种潜流人工湿地根据进水差异设置4个处理组:进水为模拟养猪废水(CK组)、模拟养猪废水中添加抗生素(抗生素组)、模拟养猪废水中添加铜(Cu组)、模拟养猪废水中同时添加抗生素和Cu(抗生素+Cu组),对2种潜流人工湿地土壤呼吸和芦苇光合作用指标进行为期1年的监测。结果表明:养猪废水中添加18.3~39.1 µg·L−1抗生素或0.8~1.2 mg·L−1铜均可抑制潜流人工湿地的芦苇根际、非根际土壤呼吸和芦苇的光合作用。与CK组相比,在抗生素和Cu复合胁迫下,水平和垂直潜流人工湿地芦苇根际土壤呼吸分别下降了20.4%~66.3%和20.8%~77.5%,非根际土壤呼吸分别下降了30.4%~71.0%、23.2%~60.7%,垂直潜流人工湿地的芦苇根际、非根际土壤呼吸在春、夏、秋季均显著高于水平潜流人工湿地。在抗生素和Cu复合胁迫下,水平潜流人工湿地和垂直潜流人工湿地芦苇的株高在运行后期与CK组相比均显著降低。与CK组相比,水平潜流人工湿地和垂直潜流人工湿地芦苇净光合速率分别下降了11.0%~73.8%和15.2%~45.3%,气孔导度和蒸腾速率也受到了抑制,胞间CO2浓度则呈增加趋势。垂直潜流人工湿地比水平潜流人工湿地对养猪废水具有更好的深度处理能力。

English Abstract

  • 抗生素和Cu具有防治畜禽疾病和促进畜禽生长的作用而被用作饲料添加剂,在规模养猪业中大量使用[1, 2]。饲料中的抗生素和Cu仅有10%~30%被猪吸收,导致养猪废水中抗生素的质量浓度达到数百µg·L−1,Cu的质量 浓度达到几十mg·L−1[2-4]。规模化养猪场废水处理普遍采用“厌氧-好氧”生物工艺,但出水水质不能稳定、完全满足《畜禽养殖业污染物排放标准》(GB 18596-2001),而且经“厌氧-好氧”生物设施处理后,养猪废水中残留的抗生素的质量浓度仍然可达几ng·L−1至几千ng·L−1,抗性基因相对丰度数量级甚至与进水相当[5-7]。无论从出水安全排放还是资源化利用,都必须对经“厌氧-好氧”工艺处理的养猪废水进行深度处理。

    在“根区法”理论基础上发展起来的人工湿地污水处理技术以其具有生态效应、运行简单等优势成为目前养猪废水深度处理的重要工艺。潜流人工湿地根据水流运移方式可分为水平潜流人工湿地 (horizontal subsurface flow constructed wetlands, HSFCWs)和垂直潜流人工湿地(vertical subsurface flow constructed wetlands, VSFCWs)[8]。DU等[9]使用沸石作为基质构建垂直潜流人工湿地,处理含有磺胺类和四环素类抗生素的养猪废水,结果显示氮素、抗生素和抗生素抗性基因的去除率均能达到95%以上。杨玲丽等[10]使用垂直潜流人工湿地处理重金属-抗生素复合水平的养殖尾水,结果表明对碳氮磷、磺胺甲恶唑、Cu的去除率较高,均在99%以上。

    微生物和植物作为人工湿地重要的组成部分,对人工湿地系统稳定运行和污染物的降解/转化有重要作用,但养猪废水中的抗生素和Cu可能影响微生物和植物的活性,不利于人工湿地长期稳定高效运行[11, 12]。土壤呼吸指土壤生物新陈代谢作用而产生CO2,是衡量土壤生态功能和土壤微生物活性的重要指标[13]。植物光合作用是植物利用光能和CO2,产生有机物和O2的过程,能反映植物的生长发育状态[14]。从土壤呼吸和植物光合作用角度来探究养猪废水中抗生素和Cu对人工湿地胁迫效应的研究鲜有报道。基于此,本研究构建垂直潜流人工湿地和水平潜流人工湿地 2种类型的潜流人工湿地,模拟养猪废水厌氧-好氧处理工艺的出水水质。同时进水中投加养猪业中常见的5大类抗生素:磺胺类、四环素类、氟喹诺酮类、β-内酰胺类、大环内酯类抗生素[15]及重金属Cu,进行为期1 a的运行实验,研究了养猪废水中微量抗生素和Cu胁迫下,水平潜流人工湿地和垂直潜流人工湿地土壤呼吸以及植物光合作用的季节变化,以期为提高和稳定潜流人工湿地深度处理养猪废水的运行性能提供基础数据。

    • 潜流人工湿地装置(图1)位于南京农业大学牌楼教学科研基地,露天放置无遮雨和遮阳处理,以便更接近实际人工湿地的环境。HSFCWs为长76 cm、宽53 cm、高49 cm的矩形箱状结构,VSFCWs为直径60 cm、高53 cm的圆柱与下部直径为20 cm、高15 cm的圆台组合的结构,装置的主要材质均为聚氯乙烯。HSFCWs内部使用穿孔板划分进水区和出水区,VSFCWs在顶部使用导流板进水,底部出水区为边坡系数0.75的斜面汇集出水。

      HSFCWs进水区和出水区均铺设40 cm高的粗碎石(粒径20~40 mm),处理区自下而上依次填充厚度分别为10 cm高的粗碎石、10 cm高的细碎石(粒径10~20 mm)和20 cm高的土壤。VSFCWs出水区铺设高40 cm高的粗碎石,处理区自下而上依次填充高度为10 cm高的粗碎石、10 cm高的细碎石和20 cm高的土壤。HSFCWs和VSFCWs均在处理区埋设4个 300目尼龙网袋(Ф=11cm),具体的位置如图1所示,其中VSFCWs中4个网袋呈中心对称分布。网袋填充相应的基质和土壤,2个网袋中以13株·m−2的密度种植长势相同的芦苇(Phragmites australis),另2个网袋中不种植芦苇,种有芦苇的网袋内土壤为根际土壤,未种植芦苇的网袋中土壤为非根际土壤。实验所用土壤挖取自南京农业大学牌楼实验基地,碎石购买于当地建材市场,芦苇挖取自基地附近河边。

    • 潜流人工湿地的进水为模拟养猪废水尾水,进水水质参照《畜禽养殖业污染物排放标准(二次征求意见稿)》的出水水质。购买猪粪有机肥,以固液比1:45加入自来水浸泡24 h得到原液,浸泡液稀释后投入适量葡萄糖、氯化铵和磷酸二氢钾调节水质。运行期间因为猪粪浸泡原液的水质不稳定,水质具有一定波动性,其中化学需氧量(chemical oxygen demand, COD)被等量换算为总有机碳(total organic carbon, TOC),具体的进水水质:TOC为24.1~48.6 mg·L−1,总氮(total nitrogen, TN)为48.4~94.5 mg·L−1,氨氮(ammonia nitrogen, NH4+-N)为33.6~63.9 mg·L−1,总磷(total phosphorus, TP)为3.36~7.12 mg·L−1,Cu为0.8~1.2 mg·L−1。调配好的废水通过高位水箱流入潜流人工湿地,表面水力负荷97.6 cm·d−1,采用间歇流的运行方式,批次运行水力停留时间约为1 d,设计参数符合《人工湿地水质净化技术指南》。

      从2021年7月,使用不含抗生素和Cu的模拟养猪废水尾水运行装置4个月后,同类型的潜流人工湿地对污染物的去除率相近且出水水质稳定,HSFCWs对TOC、NH4+-N 、TN、TP的平均去除率分别为72.1%、50.2%、59.7%、76.5%,VSFCWs分别为85.9%、89.6%、83.6%、97.5%。开始在进水中分别投加抗生素和Cu进行正式运行。正式运行时间从2022年3月开始到2022年12月结束。南京属于亚热带季风气候,2022年气温变化如图2所示,数据来源于网站www.tianqi24.com,参照候温法划分季节:4—5月属于春季;6—9月属于夏季;10—11月属于秋季;其余月份属于冬季。

      同类型的潜流人工湿地根据进水不同设置4个处理组,分别是:进水为模拟养猪废水的尾水 (CK组)、进水中额外添加Cu(Cu组)、进水中额外添加抗生素(抗生素组)、进水中额外添加抗生素和Cu (抗生素+Cu组)。分别从养猪业常见的5大类抗生素中,选择环境检出频率高、残留量相对大的抗生素进行投加,分别为磺胺甲恶唑(sulfamethoxazole, SMX)、恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)、土霉素(oxytetracycline, OTC)、头孢噻呋(ceftiofur, CEF)、罗红霉素(roxithromycin, ROX),参考实际养猪废水抗生素的检出浓度[16],设置每种抗生素进水质量浓度约为40 µg·L−1, 每种抗生素实际进水质量浓度为18.3~39.1 µg·L−1

    • 1)土壤呼吸。使用静态箱收集土壤微生物呼吸释放的CO2气体,静态箱由底座和气室构成,材质为有机玻璃,气室长6 cm、宽6 cm、高15 cm。为了降低对土壤微生物的扰动,底座提前预埋至芦苇根际和非根际土壤中。采样时间为每月上旬,选择晴朗天,从早晨8:00开始,将采样箱放入底座凹槽,加入适量水进行水封,防止采样箱气体外泄。采样箱密封准备就绪,以此时为采样0 min,开始计时,分别在10、20、40、60 min使用注射器采集10~20 mL气体于气袋中,样品采集完成后将气袋密封并立即带回实验室,使用气相色谱仪(GC-7890B, Agilent Technologies, USA)检测样品中CO2的浓度。土壤CO2排放通量的计算参考CHENG等[17]的研究,计算公式如式(1)所示。

      式中:F 为CO2排放通量,mg·(m2·h)−1M 为CO2摩尔质量,g·mol−1V0为气体在标准状态下的摩尔体积,22.41 L·mol−1T 为采样时气室气温, ℃;V 气室体积,m3A 为静态箱底座面积,m2;dc/dt 为由线性模型得到的箱内CO2浓度变化率。

      2)植物光合作用。使用卷尺(精度1 mm)于每月的15号测量芦苇的株高,每组设置3个平行样,因芦苇在春季进行新的移栽,而冬季节进行了收割,故仅对夏季和秋季的株高进行测量。使用便携式光合测定仪(Li-6400 XT, LI-COR technology, USA)原位测定芦苇光合作用参数:净光合速率(net photosynthetic rate, Pn)、气孔导度(stomatal conductance, Gs)、胞间 CO2浓度(intercellular carbon dioxide concentration, Ci)和蒸腾速率(transpiration rate, Tr)。在每月下旬晴朗天(根据天气状况在每月20号左右)测定植物的光合作用,设定内置光强为1 200 µmol·(m2·s)−1,预热仪器20 min,随机选取芦苇不同高度3片受光均匀的叶片进行测定。

    • 使用Excel 2019分析数据,结果表示用平均值±标准误差(Mean±SE)的形式,使用SPSS 23.0进行单因素方差分析(one-way ANOVA,P<0.05表明数据间存在差异为显著,使用 Origin 8.5 绘制图表。

    • 潜流人工湿地土壤呼吸变化如图3所示。可见,芦苇根际土壤HSFCWs中CK组、Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组,土壤季节平均CO2排放通量分别为20.93~229.34、18.79~126.70、17.92~87.54、14.57~74.02 mg·(m2·h)−1,VSFCWs中对应处理组季节平均 CO2排放通量分别为39.60~398.22、38.81~345.87、30.91~275.24、29.69~230.50 mg·(m2·h)−1。 在春、夏、秋、冬4个季节,VSFCWs各处理组的芦苇根际土壤CO2 排放通量均显著高于HSFCWs对应处理组(P<0.05)。HSFCWs芦苇非根际土壤中CK组、Cu组、抗生素组和抗生素+Cu组,季节平均CO2 通量分别是9.13~27.76、6.01~18.52、6.10~17.38、5.82~15.52 mg·(m2·h)−1, VSFCWs中对应处理组的季节平均 CO2排放通量分别为10.30~51.33、7.97~31.56、8.77~28.87、8.15~23.82 mg·(m2·h)−1,VSFCWs各处理组的芦苇非根际土壤CO2 排放通量均高于HSFCWs,夏季和秋季显著性高于HSFCWs(P<0.05)。HSFCWs和VSFCWs各处理组中,根际土壤 CO2排放通量均显著高于非根际土壤(P<0.05);无论非根际还是根际土壤,CO2排放通量均呈现春、夏、秋季显著高于冬季的趋势(P<0.05)。

      与CK组比,HSFCWs在Cu、抗生素和抗生素+Cu 处理下,芦苇根际土壤季平均CO2 排放通量分别降低了10.2%~47.4%、14.4%~61.8%和 30.4%~71.0%;而芦苇非根际土壤季节平均CO2 排放通量分别降低了1.19%~34.1%、5.55%~52.1%和 20.4%~66.3%。在VSFCWs中,与CK组比,芦苇根际土壤的季节平均CO2排放通量,Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组分别降低了2.0%~13.1%、10.5%~41.1%和 23.2%~60.7%,芦苇非根际土壤分别低了22.6%~38.5%、14.9%~66.0%和20.8%~77.5%。与CK组相比,在抗生素和Cu单独或复合胁迫下,HSFCWs和VSFCWs中芦苇非根际和根际土壤季节CO2排放通量均有所降低,除冬季外,春、夏、秋季的降低呈显著(P<0.05),且抗生素和Cu的复合胁迫产生的抑制效应高于单独抗生素胁迫或Cu胁迫。

    • 1)芦苇的生长状况。芦苇在夏、秋2个季节月平均株高随着时间的变化如表1所示。HSFCWs中芦苇株高在10月份达到峰值, VSFCWs中芦苇株高在11月份达到峰值, VSFCWs中芦苇的生长高度显著高于HSFCWs中的芦苇(P<0.05)。HSFCWs和VSFCWs的芦苇株高在6—9月,组内无显著性差异,但在10月和11月,Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组中芦苇株高均显著低于CK组(P<0.05),说明芦苇生长受到了抑制。

      2)芦苇的光合作用。芦苇的光合作用指标变化如图4所示。HSFCWs中CK组、Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组芦苇的净光合速率季节平均值分别为 −3.99~13.23、−4.08~12.95、−6.58~10.99、−6.94~8.77 µmol·(m2·s)−1,VSFCWs中CK组、Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组芦苇的净光合速率季节平均值分别为0.69~17.54、0.57~15.04、0.38~14.88、0.10~14.16 µmol·(m2·s)−1,除了Cu组外,VSFCWs各处理组在春夏秋冬4个季节均显著高于HSFCWs (P<0.05)。HSFCWs中CK组、Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组芦苇气孔导度季节平均值分别为0.11~0.33、0.10~0.23、0.08~0.16、0.09~0.19 mol·(m2·s)−1,VSFCWs中分别为0.29~0.46、0.13~0.36、0.07~0.34、0.10~0.26 mol·(m2·s)−1,在夏季VSFCWs各处理组芦苇的气孔导度均显著高于HSFCWs (P<0.05)。HSFCWs中CK组、Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组芦苇蒸腾速率季节平均值分别为1.94~8.30、1.74~6.82、0.70~5.09、0.83~5.50 µmol·mol−1, VSFCWs中分别为1.76~9.12、1.16~8.28、0.71~8.64、0.94~7.35 µmol·mol−1,VSFCWs中芦苇的蒸腾速率只在春季和夏季高于HSFCWs,在秋季和冬季含量较为接近。HSFCWs中CK组、Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组芦苇胞间CO2浓度季节平均值分别为206.16~460.53、251.93~465.69、268.82~575.96、253.42~557.20 mmol·(m2·s)−1,VSFCWs中分别为259.12~429.40、261.30~427.78、278.98~429.51、259.35~435.10 mmol·(m2·s)−1。芦苇的光合作用指标随季节的变化而变化,净光合速率、气孔导度和蒸腾速率总体上均呈现春、夏季高于秋、冬季的趋势,但芦苇的胞间CO2浓度随时间的变化与其他光合作用指标相反,总体呈现春、夏季低于秋、冬季的趋势。

      与CK组相比,HSFCWs中Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组芦苇的净光合速率值分别降低了 0.2%~25.6%、16.9%~64.8%和 11.0%~73.8%,抗生素+Cu组在春夏秋冬4个季节均显著低于CK组(P<0.05),抗生素组对净光合速率的抑制强于Cu组, Cu胁迫也会导致光合速率下降,但与CK组比较无显著性差异(P>0.05)。在抗生素或Cu的作用下,VSFCWs中Cu组、抗生素组、抗生素+Cu组芦苇的净光合速率也出现不同程度的降低,其中Cu组下降了14.3%~26.2%,抗生素组下降了15.2%~45.3%,抗生素+Cu组下降了19.3%~85.5%,与HSFCWs的抗生素+Cu组一样,VSFCWs中抗生素+Cu组芦苇的净光合速率最低。与净光合速率相似,在抗生素或Cu的作用下,芦苇的气孔导度和蒸腾速率也出现不同程度的下降,但均无显著性差异(P>0.05),潜流人工湿地中各处理组芦苇的胞间CO2浓度无明显的差异现象。

    • 深度处理养猪废水的2种潜流人工湿地运行了春、夏、秋、冬4个季节,VSFCWs的芦苇根际土壤和非根际土壤呼吸季均值都高于HSFCWs,说明VSFCWs中土壤微生物活性更高。2种潜流人工湿地出水水质的长期监测结果表明VSFCWs对NH4+-N、TN和TP的去除率显著高于HSFCWs,增幅分别为21.3%~40.9%、16.4%~24.5%和16.7%~30.8%,VSFCWs对养猪废水具有更好的深度处理性能[18]。ZENG等[19]发现,与水平潜流人工湿地和表面流人工湿地相比,垂直潜流人工湿地对COD值、TN和TP的去除率更高,垂直潜流人工湿地通过减少功能基因冗余、增强细菌功能和基因间相互作用促进对碳、氮、磷等的去除。VSFCWs由于其自上而下或自下而上流动的水力特点,污水在进水动能或重力势能驱动下垂直入渗土壤和基质层,水流这一流动过程容易为潜流人工湿地内部带入氧气,有利于增强内部微生物的新陈代谢作用[8],VSFCWs中水流良好的氧气运输能力及渗透性是促进土壤微生物活性高于HSFCWs的原因之一。

      HSFCWs和 VSFCWs中芦苇根际土壤呼吸都显著强于非根际土壤,说明根际土壤的微生物活性更强。艾超等[20]的研究发现植物根系可以促进根系微生物量升高,并且根际土壤水解酶活性显著高于非根际土壤。植物根系不仅可以分泌氧气,而且可以释放根系分泌物,使得植物根际土壤微生物的数量和组成受到根际环境的选择和影响[21],促进植物根际土壤呼吸作用强度的改变。抗生素和Cu具有生态毒性,对土壤微生物可能产生抑制效应。李明珠等[22]研究发现单独的磺胺嘧啶(SDZ)或是在其与Cu复合作用下,在60 d培养期内,土壤呼吸呈现先被抑制后被促进,再被抑制的趋势。LUCAS等[23]通过向土壤中添加兽用的莫能菌素,发现细菌的多样性和丰度、微生物对碳、氮的利用效率降低。养猪废水中微量抗生素和Cu单独或者复合胁迫对HSFCW和 VSFCWs芦苇根际和非根际土壤呼吸呈现出持续抑制效应,抗生素和Cu的复合胁迫抑制作用最强,高于单独抗生素胁迫和单独Cu胁迫。同时抗生素和Cu也直接影响到了潜流人工湿地对污染物的去除效率,在本研究的HSFCW和 VSFCWs中,加入抗生素或Cu的处理组对TOC、NH4+-N、TN和TP的平均去除率相比于CK组分别下降了3.7%~15.9%、3.8%~23.1%、3.1%~17.9%和1.8%~8.1%,除了HSFCW和 VSFCWs对TOC的去除、VSFCWs对TP的去除外,均具有显著性的差异[18]

    • 潜流人工湿地进水中的抗生素和Cu可以通过植物根部的吸附和吸收作用进入到植物组织,当进水中抗生素和Cu的浓度高至一定范围时,不仅会抑制植物生长,还会通过降低植物叶绿素含量、抑制相关酶活性等方式削弱植物的光合作用[24-26]。本研究中,进水中微量的抗生素和Cu不仅对HSFCWs和 VSFCWs的土壤呼吸产生胁迫作用,而且影响了芦苇的生长和叶片的光合作用。与CK组相比,在抗生素和Cu胁迫下,潜流人工湿地中芦苇株高降低,在秋季时显著低于CK组,同时芦苇的净光合速率显著低于CK组,气孔导度和蒸腾速率相比于CK组降低。净光合速率能够直接反映植物的光合作用水平,气孔导度能够反映叶片的气孔开放情况,控制着植物与环境中气体的交换[14],而蒸腾速率是植物调控自身水分耗损的重要指标,净光合速率、气孔导度和蒸腾速率之间的变化趋势呈正相关,当植物的光合作用较强时,净光合速率较大,并且叶片张开气孔,蒸腾速率变强[27]。而芦苇胞间CO2浓度的变化趋势与净光合速率、气孔导度和蒸腾速率这些光合作用指标的变化趋势相反,可能与植物对环境中CO2的利用速率有关,当光合作用较强时,植物消耗的CO2高于进入叶片胞间的CO2,导致胞间CO2浓度下降[28]。LIU等[29]发现当环丙沙星(CIP)、土霉素(OTC)和磺胺二甲嘧啶(SM2)的质量浓度大于10 µg·L−1时,对芦苇的根系活性和叶绿素有毒性作用。杨勇等[30]发现在不同质量浓度的环丙沙星(CIP)和土霉素(OTC)处理下,烤烟幼苗叶片的净光合速率、气孔导度和蒸腾速率受到了抑制,胞间CO2浓度反而增加。WEN等[31]发现0.15 mg·L−1的Cu2+损伤了马尾藻幼孢子体的光合系统。这些研究结果表明低质量浓度抗生素和Cu2+对植物的抑制效应与本研究结果较一致。

    • 1)在微量抗生素和Cu胁迫下,VSFCWs与HSFCWs相比,土壤呼吸、芦苇生长均高于HSFCWs,VSFCWs具有更好的深度处理养猪废水的性能。

      2)养猪废水中微量抗生素和Cu,对潜流人工湿地土壤微生物活性和植物光合作用均存在抑制效应,从而影响用于深度处理养猪废水潜流人工湿地的处理性能。抗生素和Cu复合胁迫对潜流人工湿地植物和土壤微生物的生态毒性高于抗生素或Cu的单独胁迫。

    参考文献 (31)

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